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几种检测粪便隐血方法的比较
2017-06-13

隐血试验(Occult blood test OB-T)是临床诊断消化道出血检查中项重要项目,也是普查筛选上消化道肿瘤的一有效手段本文分别用胶体金隐血试纸、邻联甲苯胺法、隐血试纸3方法检测不同的样本,结果胶体金免疫方法简便、快速,敏感度和特异性强,但受到高浓度Hb及标本pH值的影响;邻联甲苯胺法、隐血试纸法存在假阳性且易受各种因素影响,但不受到高浓度Hb及标本pH值的影响。现详细比较如下。

1 材料与方法

1.1 材料 胶体金隐血试纸条,美国万华牌(W.H.);一步法便隐血试纸条(简称WH试纸,每盒皆有国家抽检合格证书);尿便隐血试纸优利特10A(四甲基联苯胺法,桂林医疗仪器厂,批号20031103)及邻联甲苯胺法隐血试剂,均严格按说明书操作 。

1.2 方法

1.2.1 灵敏度的测试 用蒸馏水将正常人粪便稀释,加入纯化的血红蛋白质控品(自制),制成不同系列浓度,然后用胶体金隐血试纸条,隐血试纸,邻联甲苯胺法分别测定含不同浓度Hb的粪便稀释液。

1.2.2 特异性的测定 收集鸡、牛、羊、猪、兔、狗的血制成500μg/ml的Hb溶液,分别用3种方法测定。

1.2.3 pH值对实验的影响 以0.1mmol/L HCL,0.1mmol/L NaOH配成pH值0~14系列空白及加入适量Hb(120)μg/ml的溶液分别以3种方法测定。

1.2.4 干扰实验

1.2.4.1 Vit C的干扰 在含200μg/ml Hb的粪便悬液中加入不同浓度Vit C,分别以3种方法测定。

1.2.4.2 辣根过氧化物酶(POD)的干扰 正常粪便加入200μg/ml的POD,分别以三种方法测定。

1.2.4.3 三种方法测定 选择食用动物肉类、血、肝脏、叶绿素、铁剂、服中药者的便,分别以3种方法测定。

2 结果

2.1 灵敏度 3种方法适宜检测Hb的浓度范围:胶体金试纸为0.15μg/ml~2000μg/ml,当出现柏油便Hb>2000μg/ml时须充分稀释(50~100)便样后再测;隐血试纸为>0.25μg/ml,邻联甲苯胺法为>2μg/ml,以胶体金方法检测灵敏度较高。

2.2 特异性 隐血试纸、邻联甲苯胺法检测各种动物血液隐血均为阳性;胶体金法结果为阴性,此法不受异种动物Hb的影响,特异性较高。

2.3 pH值影响 胶体金方法测隐血最适pH值约为绝大人粪便的pH值为3~10,当pH值>10或<3时测定结果受影响;隐血试纸,邻联甲苯胺法不受其影响。

2.3.1 维生素C干扰 当维生素C浓度达到5mg/ml时,隐血试纸,邻联甲苯胺法测试呈现不同程度的假阴性结果;胶体金方法在维生素C浓度达到60mg/ml时,不受其影响。

2.3.2 POD的干扰 隐血试纸、邻联甲苯胺法呈阳性反应;胶体金方法阴性,不受POD的干扰。

2.3.3 饮食影响 隐血试纸,邻联甲苯胺法不同程度受到饮食的影响;而胶体金法不受其影响。

3 讨论

便隐血实验常用的几种方法中,以胶体金免疫方法测定隐血简单、迅速,且有较高的灵敏性和特异性,不受饮食和药物的干扰,但象其它检测方法一样,种方法也有它的不足,比如对高Hb的柏油便,必须充分稀释后再测;正常人可能由于某些药物(阿司匹林等)刺激胃肠道引起隐血假阳性之类。我们要充分了解各种实验的特点,避其弱项,联合应用,不能武断的肯定或否定某种临床诊断试验。

参考文献

1 寇丽筠,陈宏础,丛玉隆,等.临床基础检验学.第二版.北京:人民卫生出版社,1999,144.

2 叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程.第二版.南京:东南大学出版社,1997,142-143.

作者单位:102413北京核工业北京401医院检验科

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